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天津本生生物共享:ELISA試劑盒質(zhì)保的七要素

更新時間:2022-03-07    點(diǎn)擊次數(shù):2568

  天津本生生物共享:ELISA試劑盒質(zhì)保的七要素


  ELISA試劑盒對化學(xué)試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴(yán)厲和專門化。對試劑的加強(qiáng)管理。ELISA試劑盒質(zhì)量確保是一個雜亂的進(jìn)程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量。今日天津本生生物與您共享影響ELISA試劑盒質(zhì)保的七要素。

  一、辦法學(xué)的影響

  ELISA測定模式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競賽抑制法,其中競賽抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的平競賽等要素的影響,成果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。

  二、試劑要素

  不同批次的ELISA試劑在制造進(jìn)程中很難確保質(zhì)量*一致,即使是經(jīng)過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異,因而必須選擇和訂貨長批號的試劑,并確保保存條件。嚴(yán)厲執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號改動而從頭樹立質(zhì)控系統(tǒng)及從頭評估試劑的雜亂進(jìn)程,并且可以確保成果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止重復(fù)凍融造成試劑的失效。

  三、樣本要素

  標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素,ELISA試劑盒前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存時間過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。

  四、操作要素

  ELISA操作步驟雜亂,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

  五、灰區(qū)的設(shè)置

  通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽性”和“陰性”來陳述成果,兩者間有一條分界線被稱為

  “陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定成果陳述的依據(jù)。

  六、標(biāo)本復(fù)查

  ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂,影響要素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成成果的差異,因而加大復(fù)查力度是確保成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見模式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。

  七、常表明成果的常用辦法

  1.定性測定

  2.半定量測定 成果一般以滴度表明。

  3.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,制作規(guī)范曲線,成果以jue對量或單位表明。在ELISA試劑盒定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。

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